Métiers mal payés, exprimons nous !

[Invité §mou628SZ]

 

Ah... tu vois.

 

Ça arrive même aux meilleurs.

 

 

D'un autre coté c'est son PC

 

Les gonzesses ça prend autant soin d'un PC que d'une bagnole

[Invité §Tlz732DJ]

 

Sans utiliser google (contrairement a toi) je peut te faire pleurer en biologie, en neurogénèse, en physiologie animale et végétale, en biologie du développement de Paracentrotus lividus etc...

Alors le golio, maintenant quel sujet domine tu ?

 

Je te prends quand tu veux sur ce terrain

[Invité §alp706PP]

Sauf qu'on est pas vraiment en novembre là.

Comme quoi il y a une monde entre la biologie et la réalité.

 

 

 

 

Ah tu revient toi?

Pas capable de définir un YAC ou de trouver une réponse exacte a ma question.

Le 12..

[Invité §mou628SZ]

Je te prends quand tu veux sur ce terrain

 

 

C'est chaud

[Invité §Tlz732DJ]

 

Je dirais qu'il faut commencer par la réalisation d'un gène artificiel associant trois parties :

- la séquence codante d'un gène bactérien

- un promoteur de l'ADN-T d'Agrobacterium

- un terminateur de ce même ADN-T.

 

Les deux dernières parties constituent des parties du plasmide Ti de la bactérie et sont nécessaires pour pouvoir faire fonctionner le gène associé dans un environnement nouveau, la cellule végétale. Le gène ainsi construit est alors introduit dans un plasmide Ti "désarmé" (ne comportant plus de gènes tumoraux), lui-même réintroduit dans une bactérie Agrobacterium.

 

Ensuite une incubation de la bactérie modifiée avec des fragments découpés de feuille de tabac ; au niveau de la coupure, les cellules végétales sont blessées, ce qui stimule le système naturel de transfert de gènes d'Agrobacterium. Les fragments de feuilles sont ensuite incubés en présence de kanamycine et seules les cellules transformées proliféreront et donneront des cals.

 

Pour terminer, une culture de ces cals sur des milieux appropriés contenant des phytohormones, certaines des cellules donneront des bourgeons, qui s'enracineront ensuite pour régénérer des plantes entières (propriété de totipotence des cellules végétales somatiques). Afin de vérifier que les plantes régénérées sont bien transformées, on séme leur graines (obtenues par autofécondation) qui, semées dans un milieu contenant de la kanamycine, donnent - soit des plantes dépourvues de chloroplastes (la kanamycine interfére avec le développement des chloroplastes). Ces plantes sensibles sont blanches et leur développemnt est alors arrêté (photosynthèse impossible). Elles meurent. - soit des plantes chlorophylliennes normales. Dans ce cas, ces dernières sont résistantes à l'antibiotique, car elles fabriquent l'enzyme néomycine-phosphotransférase qui annule la toxicité de la kanamycine (processus de détoxification) et assure la mise en place de chloroplastes fonctionnels nécessaires à la poursuite du développement.

 

J'ai bon ?

 

 

EDIT : tu peux quitter ce forum maintenant.

 

 

 

Pas mieux

 

C'est moche

 

[Invité §Tlz732DJ]

 

 

BOUNNNN mauvaise réponse.

Le plasmide Ti et la technique des Agrobactéries n'est pas possible pour les gènes d'une taille supérieur a 3Kb. Il faut donc utiliser un YAC et la meilleure technique pour cela sera la biolistique...

 

Je te tient la porte.

 

LOL

 

Le plasmide Ti fait 190kb ? et n'importe quelle région codante peut être lues ? Alors d'où tu nous sors ton 3kb Mongolito ? :???:

 

Genre la taille du gène définit la taille de la protéine à venir

 

"Attention ! Attention ! la cellule va exploser si ça dépasse 3 kb"

[Invité §Cra883ru]

 

D'un autre coté c'est son PC

 

Les gonzesses ça prend autant soin d'un PC que d'une bagnole

 

 

Alors là, c'est un peu facile de mettre ça sur le dos des femmes

[Invité §alp706PP]

Tlz1 que je sache tu ne peut pas mettre un plasmide supérieure a la taille du plasmide transformer.

C'est pour cela que les YAC et BAC on était fabriqué.

Donc si la taille de l'insert dépasse 3kb le taux de transformation est nulle vu qu'il y a perte de l'insert.

C'est d'ailleur ce protocole et la difficulté de régéneration des protoplastes chez les monocotylées qui a fait qu'il y a eu utilisation de la biolistique.

Mais je te l'accorde on peut aussi utiliser des technique d'électroporation avec des liposomes et utiliser alors un insert assez grand.

 

En tout cas, je vois que tu comprend pas que il n'y a pas de relation entre perte de l'insert et lyse cellulaire.

 

Donc tu maitrise tout ce que j'ai cité dans mon post précedent. Si tu maitrise le developpement de paracentrotus, tu a obligatoirement fait un stage chez Davidson soit en France a l'UMR 7009 de Villefranche sur mer?

Quel groupe, quel gène? Fonctionnement et cascade de Nodal?

[Invité §Tlz732DJ]

Tlz1 que je sache tu ne peut pas mettre un plasmide supérieure a la taille du plasmide transformer.

C'est pour cela que les YAC et BAC on était fabriqué.

Donc si la taille de l'insert dépasse 3kb le taux de transformation est nulle vu qu'il y a perte de l'insert.

C'est d'ailleur ce protocole et la difficulté de régéneration des protoplastes chez les monocotylées qui a fait qu'il y a eu utilisation de la biolistique.

Mais je te l'accorde on peut aussi utiliser des technique d'électroporation avec des liposomes et utiliser alors un insert assez grand.

 

En tout cas, je vois que tu comprend pas que il n'y a pas de relation entre perte de l'insert et lyse cellulaire.

 

Donc tu maitrise tout ce que j'ai cité dans mon post précedent. Si tu maitrise le developpement de paracentrotus, tu a obligatoirement fait un stage chez Davidson soit en France a l'UMR 7009 de Villefranche sur mer?

Quel groupe, quel gène? Fonctionnement et cascade de Nodal?

 

Putain, Venousto à un frère biologiste

 

Je ne vois pas de quoi tu parles

 

Edit : merci, on sait par où tu es passé, on va avoir ton nom et prénom à balancer, soon.

[Invité §BHO750yy]

Putain, Venousto à un frère biologiste

 

Je ne vois pas de quoi tu parles

 

Edit : merci, on sait par où tu es passé, on va avoir ton nom et prénom à balancer, soon.

 

Plus vite qu'il ne le croit

[Invité §Tlz732DJ]

Plus vite qu'il ne le croit

 

Mais attention hein, pas sur FA

 

[Invité §alp706PP]

Très simple:

 

-Un insert

-Un plasmide

-Une transformation agrobacterienne

-Une transformation protoplaste ou cellule complète.

 

Si tu met dans un plasmide un insert trop gros il le perd. Chaque plasmide a une taille limite de transformation. Si tu la dépasse tu perd l'insert.

Ton pTi n'arrive pas a transformer en border line un gène superieur a 3Kb. Il suffit de voir la thèse de Karine lièvre par exemple, qui a était obligé d'utiliser une souche d'E.Coli pour sa transformation.

Donc dans le cas d'un insert de 8kb ton ratio 1:1 voir 1:20 va nécessité un plasmide plus grand pour avoir un taux de transformation plus importants. Donc un YAC est fortement conseillé surtout avec leur taux de réussite. Tu peut aussi utiliser une souche d'E. Coli mais le résultat sera complexe et le nombre d'enzyme de restriction va être limité (surtout vu les ER sur le RB de pTi).

[Invité §Cra883ru]

Mais attention hein, pas sur FA

 

 

 

Non mais là tu supposes qu'il a fait des études suffisamment poussées pour arriver jusqu'à un stage

[Invité §alp706PP]

Au fait au passage Tlz1= vincent non?

[Invité §Tlz732DJ]

Au fait au passage Tlz1= vincent non?

 

McDoom

[Invité §Tlz732DJ]

 

Non mais là tu supposes qu'il a fait des études suffisamment poussées pour arriver jusqu'à un stage

 

Ce qui limiterait les recherches aux stages en entreprise a effectuer en 3ème ?

[Invité §mou628SZ]

McDoom

 

 

Lagaf

[Invité §Cra883ru]

McDoom

 

 

C'est exactement l'image que je me faisais de toi

[Invité §Tlz732DJ]

 

C'est exactement l'image que je me faisais de toi

 

J'ai les mêmes traits que toi, Papa.

 

 

Tu l'as cherché

[Invité §alp706PP]

Tlz1 non je me poser juste la question...

Pour voir si tu était une personne de ma connaisance....

[Invité §Tlz732DJ]

Et d'ailleur, AM, je n'apprécie pas trop qu'on balance mon prénom sur FA

[Invité §alp706PP]

Ah bon?

 

Surtout que ce n'est pas le tient.

[Invité §Tlz732DJ]

Tlz1 non je me poser juste la question...

Pour voir si tu était une personne de ma connaisance....

 

Rassure moi sur un point :

 

Tu payes toujours quelqu'un pour écrire tes rapports ? :???:

[Invité §alp706PP]

Non.

Sauf pour la traduction en Anglais de mes présent', ou mes data.

[Invité §ore865QO]

Tlz1 que je sache tu ne peut pas mettre un plasmide supérieure a la taille du plasmide transformer.

C'est pour cela que les YAC et BAC on était fabriqué.

Donc si la taille de l'insert dépasse 3kb le taux de transformation est nulle vu qu'il y a perte de l'insert.

C'est d'ailleur ce protocole et la difficulté de régéneration des protoplastes chez les monocotylées qui a fait qu'il y a eu utilisation de la biolistique.

Mais je te l'accorde on peut aussi utiliser des technique d'électroporation avec des liposomes et utiliser alors un insert assez grand.

 

En tout cas, je vois que tu comprend pas que il n'y a pas de relation entre perte de l'insert et lyse cellulaire.

 

Donc tu maitrise tout ce que j'ai cité dans mon post précedent. Si tu maitrise le developpement de paracentrotus, tu a obligatoirement fait un stage chez Davidson soit en France a l'UMR 7009 de Villefranche sur mer?

Quel groupe, quel gène? Fonctionnement et cascade de Nodal?

 

 

harley davidson???? [:brankignol29]

[Invité §alp706PP]

Oui il fait aussi du tennis, il fait toute les moto , travaille sur l'oursin paracentrotus lividus, et je ne sais plus quoi...

 

C'est comme Harmstrong.

[Invité §and621DK]

5% de réduc...Aie.

Et maintenant tu fait quoi pour info?

 

 

Boulanger. Je suis retourner à l'école à 24 ans

Je gagne assez bien ma vie maintenant: 1 500€ net pour 39h/semaine tous compris (heures sup, dimanche, nuits, etc...)

Merci Sarko pour les heures sup défiscalisé c'est 150€ net de plus par mois pour moi

[Invité §alp706PP]

Tient un boulanger lol.

Tu travaille dans une boulangerie ou dans une grosse societé?

Peut tu nous dire ce que tu pense du nombre de boulanger qui font encore cuir leur pain dans leur officine, vis a vis de ceux qui font ça de façon "industrielle?".

[Invité §cri366pt]

Alors la , je jubille de joie , crapahut a trouvé son maître et il viens d'être mit a nus devant le mur du ridicule.

 

Un grand moment F A

 

 

et cracra souris voila ce qui arrive a prendre les gens pour des idiots quand ne le sont pas

[Invité §cri366pt]

 

Boulanger. Je suis retourner à l'école à 24 ans

Je gagne assez bien ma vie maintenant: 1 500€ net pour 39h/semaine tous compris (heures sup, dimanche, nuits, etc...)

Merci Sarko pour les heures sup défiscalisé c'est 150€ net de plus par mois pour moi

 

 

 

C'est une blague , j'en gagne 300€ de plus et je considére gagner mal ma vie.

 

Il faut dire que en belgique tout est racketé et surtaxé alors que en france hormis le logement c'est plus soft.

[Invité §Cra883ru]

Alors la , je jubille de joie , crapahut a trouvé son maître et il viens d'être mit a nus devant le mur du ridicule.

 

...

 

 

Tu vois, c'est exactement ce type de post qui fait de toi quelqu'un de très bête.

 

Vous deux, vous êtes certainement les deux membres les plus idiots de ce forum. Et rien que cela, c'est un exploit.

[Invité §Cra883ru]

 

 

C'est une blague , j'en gagne 300€ de plus et je considére gagner mal ma vie.

 

Il faut dire que en belgique tout est racketé et surtaxé alors que en france hormis le logement c'est plus soft.

 

 

Ah non, j'oubliais, voici encore une fois de plus un de tes posts emprunt d'une grande intelligence. On est racketté, on nous taxe trop, c'est de la faute du méchant gouvernement si j'ai une vie de merde.

 

Demeuré.

[Invité §cri366pt]

 

Ah non, j'oubliais, voici encore une fois de plus un de tes posts emprunt d'une grande intelligence. On est racketté, on nous taxe trop, c'est de la faute du méchant gouvernement si j'ai une vie de merde.

 

Demeuré.

 

 

 

je vois pas en quoi dire la vérité sur ce pays fait de moi un demeuré.

 

tu es vraiment idiot ou tu le fais expres.

[Invité §cri366pt]

 

Tu vois, c'est exactement ce type de post qui fait de toi quelqu'un de très bête.

 

Vous deux, vous êtes certainement les deux membres les plus idiotsréfléchis de ce forum. Et rien que cela, c'est un exploit.

 

 

la je suis d'accord.

[Invité §Art270hn]

 

la je suis d'accord.

 

Putain mais t'as quel age ?

 

Je comprends que tu essayes de tenir tête pour pas te ridiculiser, mais là c'est du niveau CP, même mon petit frère il a arrêté quoi ... :/